Informace o soupravě:

·         Specifické protilátky proti viru VHS jsou navázány v jamkách dělené mikrotitrační destičky.

·         Souprava umožňuje provedení 96 vyhledávacích (screeningových) vyšetření, včetně kontrol.

·         Soupravu je možno použít jednorázově nebo zpracovávat postupně menší soubory vzorků.

·         Citlivost metody (102,8 -10 3,5 TCID50/ 0,1 ml vyšetřované tekutiny) je dostatečná pro rutinní vyšetření terénních vzorků.

·         Celková doba vyšetření dle délky inkubace vzorků:

o   přes noc: výsledky do druhého dne

o   rychlý test: asi 2,5 hod.

·         Souprava je ověřena ve Výzkumném ústavu veterinárního lékařství v Brně a Státních veterinárních ústavech.

·         Souprava je schválena Ústavem pro státní kontrolu veterinárních biopreparátů a léčiv.

·         Souprava je vyráběna v souladu se správnou laboratorní praxí (GMP).

·         Expirace soupravy je 18 měsíců od data výroby.

Využití soupravy:

·         Průkaz VHSV v orgánových homogenátech i v kultivačních médiích infikovaných buněčných kultur.

·         Diagnostika nákazy.

·         Kontrola ryb před přesuny.

·         Kontrola ryb v karanténách (export, import).

Stručný pracovní postup:

1.       Ředění a pipetování vzorků, kontrolních antigenů a RAVHSV do jamek:

a) screening: 1+1 (vzorek + RAVHSV) přímo v jamkách mikrotitrační destičky

b) titrace:      1+1 (vzorek + RAVHSV) až 1+255 přímo v jamkách mikrotitrační destičky

2.       Inkubace:

a) přes noc: 14–18 hod při 4–8 °C

b) rychlý test: 60 min při 37 °C

3.       Odsátí a promytí jamek 4 krát.

4.       Dávkování Konjugátu (protilátka proti králičímu IgG značená peroxidázou).

5.       Inkubace 60 min při 37°C.

6.       Odsátí a promytí jamek 4 krát.

7.       Dávkování jednosložkového substrátu (TMB-Complete).

8.       Inkubace 10 min při 20°C.

9.       Dávkování Zastavovacího roztoku (H2SO4).

10.   Fotometrické měření absorbance při vlnové délce 450 nm.

11.   Vyhodnocení výsledků.