Informace o soupravě:
· Použitý antigen: kombinace vybraných částí specifických antigenů Bordetella pertussis (PT, FHA, ACT, TCF) a Bordetella parapertussis (Pertactin, FimN, EntA).
· Rekombinantní antigeny jsou naneseny formou mikroteček (spotů) v tripletech na nitrocelulózovou membránu ve formátu mikrotitrační jamky.
· V případě přítomnosti specifických protilátek dochází k jejich vazbě na jednotlivé separované antigeny.
· V následujících krocích jsou navázané protilátky označeny Konjugátem a detekovány barevnou reakcí se Substrátovým roztokem (BCIP/NBT).
· Souprava umožňuje 48 testů.
· Krátké inkubační doby, celková doba vyšetření je asi 1,5 hod.
· Každý jednotlivý test obsahuje kontrolní spoty, které slouží ke kontrole funkčnosti a citlivosti soupravy, a dále spoty pro kontrolu přítomnosti příslušného konjugátu.
· Soupravy obsahují pozitivní kontrolu umožňující validaci testů.
· Pro kvantitativní vyhodnocení obsahují jamky kalibrační spoty.
· Všechny roztoky jsou dodávány v pracovním ředění.
· Možnost postupného zpracování souprav, roztoky jsou v dostatečném nadbytku.
· Vyhodnocení pomocí Microblot-Array readeru a příslušného softwaru.
Využití:
· Diferenciální diagnostika pertuse a parapertuse.
· Konfirmační metoda k ELISA a/nebo aglutinační reakci.
Stručný pracovní postup:
1. Ředění vzorků sér a plazem (1:51).
2. Pipetování ředěných vzorků.
3. Inkubace 30 min při laboratorní teplotě.
4. Promytí 3 × 5 min.
5. Dávkování Konjugátu.
6. Inkubace 30 min při laboratorní teplotě.
7. Promytí 3 × 5 min.
8. Dávkování substrátu (BCIP/NPT).
9. Inkubace 15 min při laboratorní teplotě.
10. Promytí 2 × 5 min v destilované vodě.
11. Vysušení a vyhodnocení testu.