Informace o soupravě:
· Specifické protilátky proti viru IPN jsou navázány v jamkách dělené mikrotitrační destičky.
· Souprava umožňuje provedení 96 vyhledávacích (screeningových) vyšetření, včetně kontrol.
· Soupravu je možno použít jednorázově nebo zpracovávat postupně menší soubory vzorků
· Citlivost metody (102 TCID50/ 0,1 ml vyšetřované tekutiny) je dostatečná pro rutinní vyšetření terénních vzorků.
· Celková doba vyšetření dle délky vzorků:
o přes noc: výsledky do druhého dne
o rychlý test: asi 2,5 hod.
· Souprava je ověřena ve Výzkumném ústavu veterinárního lékařství v Brně a Státních veterinárních ústavech.
· Souprava je schválena Ústavem pro státní kontrolu veterinárních biopreparátů a léčiv.
· Souprava je vyráběna v souladu se správnou laboratorní praxí (GMP).
· Expirace soupravy je 18 měsíců od data výroby.
Využití soupravy:
· Průzkum IPNV v orgánových homogenátech i v kultivačních médiích infikovaných buněčných kultur.
· Diagnostika nákazy.
· Kontrola ryb před přesuny.
· Kontrola ryb v karanténách (export, import).
Stručný pracovní postup:
1. Ředění a pipetování vzorků, kontrolních antigenů a RAIPNV do jamek:
a) screening: 1+1 (vzorek + RAIPNV) přímo v jamkách mikrotitrační destičky
b) titrace: 1+1 (vzorek + RAIPNV) až 1+255 přímo v jamkách mikrotitrační destičky
2. Inkubace:
a) přes noc: 14–18 hod při 4–8 °C
b) rychlý test: 60 min při 37 °C
3. Odsátí a promytí jamek 4 krát.
4. Dávkování Konjugátu (protilátka proti králičímu IgG značená peroxidázou).
5. Inkubace 60 min při 37°C.
6. Odsátí a promytí jamek 4 krát.
7. Dávkování jednosložkového substrátu (TMB-Complete).
8. Inkubace 10 min při laboratorní teplotě.
9. Dávkování Zastavovacího roztoku (H2SO4).
10. Fotometrické měření absorbance při vlnové délce 450 nm.
11. Vyhodnocení výsledků.